中国联络处:400-900-5122


植人前遗传学诊断的方法

发布时间:2018-09-21 14:34:55


目前,PGD常用的诊断方法有单细胞PCR技术、荧光原位杂交(FISH)技术等。
巢式PCR PCR通过“内”“外”两对引物,首次用外引物进行大片段 产物的扩增,二次扩增则以大片段产物为模板,对与其内侧序列互补的内引物 进行小片段产物的特异性扩增的方法。与单次PCR相比,巢式PCR对特定的基 因片段连续两次放大后,其诊断的敏感性、特异性大大提高。
荧光PCR采用荧光标记的不同引物或dNTP针对特异性基因片段或基 因组内的短串联重复序列进行扩增,PCR产物经自动DNA测序仪或扫描仪分 析。
多重PCR在一次PCR反应中,对基因组中多个位点采用不相关的多对 引物同时进行扩增,再结合巢式PCR技术针对目的基因分别进行内扩增或结合 荧光PCR自动测序技术得到诊断结果。
全基因组扩增(WGA) 在PGD中最常用的WGA是引物延伸预扩增 (PEP)。PEP采用15个碱基的随机引物序列对单个细胞的整个基因组进行扩 增,可以在不知道特异性DNA序列的情况下检测DNA的多态性。在扩增时,能与基因组DNA相应位点随机退火结合,把目的基因拷贝为多个,针对该目的基 因进行二次扩增。
荧光原位杂交(FISH)技术染色体荧光原位杂交是用荧光染料对 DNA探针进行标记。着色探针适于对中期染色体进行结构分析。恩诺代孕中心,多条染色体 FISH检测时每个DNA探针都要用不同的荧光染料进行标记。运用FISH进行PGD 的适用范围:①染色体数目异常;②染色体结构异常;③X连锁隐性遗传病进 行 PGD。
在不经过超促排卵,或少量应用促性腺激素(Gn)后从卵巢中获取未成 熟卵,在体外经过适宜的条件进行体外成熟培养,使卵母细胞成熟并具有受 精能力,即为未成熟卵母细胞体外成熟培养(IVM)技术。1992年已有报道将 不成熟的人卵母细胞在体外培养成熟并通过ICSI技术获得临床妊娠。