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未成熟卵的体外成熟培养

发布时间:2018-09-26 15:58:27


未成熟卵的采集
未成熟卵的取卵过程与成熟卵基本相同,但是需要用特制的取卵针(针尖 端的长度缩短,更锐利),而且需要降低吸引的负压为10.67 ~ 13.33 kPa。在 37 的热台上将收集的卵泡液在细胞过滤网上过滤(70pm),过滤后收集到 的组织在培养皿来回滑动,挑选出未成熟卵。
未成熟卵的体外成熟培养
得到的卵子在解剖显微镜下机械法去除卵母细胞周围包裹紧密的卵丘细 胞,观察卵母细胞的胞质中是否含有生发泡(GV),或者在卵间隙中是否出现 第一极体。如果卵细胞质内见GV,无极体,为GV期卵;如无GV,也无极体, 为第一次减数分裂中期(metaphase I,MI)的卵。确认其成熟程度后,将未成 熟卵移入IVM培养液中培养。体外成熟培养的时间大多在24 ~ 48 h,现有研究表 明体外培养30 h以内成熟的GV期卵比那些需要更长培养时间的卵有更好的发育 潜能。
体外成熟卵的受精方式
体外培养成熟的卵子可进行IVF或ICSI受精,如男方精液正常,IVF与ICSI的受精率、卵裂率及临床妊娠率无显著差异。IVF或ICSI后16 ~ 18 h观察受精, 第3天进行胚胎移植。
子宫内膜准备及黄体支持
取卵当天子宫内膜厚度&6mm,补充戊酸雌激素(补佳乐)4~6mg;子 宫内膜<6mm,补充补佳乐8~10mg。取卵第2天肌内注射黄体酮60mg,第3天 开始80 mg/d,移植当天子宫内膜&7 mm进行胚胎移植,若子宫内膜<7 mm则进 行胚胎冷冻。
胚胎移植后14天检查血清HCG确定是否妊娠。移植后35天B超检查确认胎 心。在确定妊娠后雌激素逐步减量至妊娠2个月停药,孕激素逐步减量至妊娠3 个月停药。
IVM的前景及安全性
IVM的妊娠率与常规IVF相比有一定差距,但为PCOS妇女的治疗开辟了一
条新的有效途径,为不孕症患者(特别是某些雌激素依赖性肿瘤术后患者)的 辅助生育提供了更安全、更经济的治疗手段。在提高临床妊娠率的同时,将会 有更多的患者愿意接受IVM治疗。恩诺代孕中心,通过对卵母细胞成熟机制的探讨和研 究,可以进一步了解人类卵子和胚胎的发育机制,并为人类生育力的储备提供 可能。
目前,IVM在理论及技术上尚不完善,还有很多问题值得进一步探讨, 如:取卵的时机、有效地收集卵子的方法、是否使用Gn/HCG、培养液及培养条 件、子宫内膜的准备等。
关于IVM的安全性,已有的文献报道,IVM与IVF相比,未发现IVM技术出 生的婴儿先天畸形率有明显升高。早产率、多胎率、妊娠期疾病与PCOS妇女行 IVF-ET治疗的发生率相似。